באזורי הנגב, בהם נמצא הגן הלאומי תל- באר שבע ניתן למצוא בעלי חיים רבים בעלי אופי מדברי, לדוגמא: צבי מדבר, צבי השיטים, יעל מדברי, ראם לבן, חתול הקרקל ועוד מגוון מינים נוספים של בעלי חיים. כמו כן, ניתן למצוא באזור הנגב צמחים רבים ומגוונים: אביבית בינונית, אדמדמית פלשתית, אהל מצוי, אהרונסוניית פקטורי, אוג קוצני, אזובית המדבר, אחישבת ענף, אטד החוף, אירוס הנגב, אירוס ירוחם, אירוס שחום ועוד רבים